部分克隆子不穩定，在轉代培養中可能會發生缺失或重排；
難與酵母染色體區分開，因為YAC與酵母染色體具有相似的結構；
操作時容易發生染色體機械切割；
轉化效率低。
細菌人工染色體（BAC）
易於用電擊法轉化E.coli（轉化效率比轉化酵母高10-100倍）；
超螺旋環狀載體，易於操作；
F'質粒本身所帶的基因控製了質粒的複製；
很少發生體內重排。
（3）其它類型的人工染色體（PAC和TAC）
－P1人工染色體(P1ArtificialChromosome，PAC）
－植物可轉基因人工染色體
常用的基因克隆方法有哪幾類？各有什麽特點？實際應用中有什麽要求？
以已知序列為基礎的基因克隆方法
以分子標記連鎖圖譜為基礎的基因克隆方法
以人工突變體為基礎的基因克隆方法
以表達差異為基礎的基因克隆方法
利用生物大分子之間相互作用的基因克隆方法。
5、什麽是基因文庫？基因文庫有哪兩類？
6、用於植物遺傳轉化的生物載體有哪兩類？
（1）病毒載體：
?單鏈RNA植物病毒
?單鏈DNA植物病毒
?雙鏈DNA植物病毒
（2）質粒載體：
?Ti質粒（根瘤土壤杆菌）
?Ri質粒（毛根土壤杆菌）
7、根癌農杆菌為何能誘發植物冠癭瘤形成？
8、Ti質粒的主要結構區域和功能。
（1）毒性區（vir區）：激活TT－DNA的轉移
（2）T－DNA區：侵染植物時，從Ti質粒上被切割，轉移到植物細胞中，帶有與腫瘤形成
有關的基因
（3）質粒接合轉移區（Con區）：存在與細菌間進行接合有關的基因
（4）質粒複製起始區（Ori區）：保證Ti質粒進行自我複製。
（5）冠癭堿分解位點
9、T-DNA的結構和功能。
結構：（1）一般在23kb左右，都含有一段8kb左右的核心區（2）在T-DNA的5’端和3’端都有真核表達信號，如TATA-box、AATAA-box及poly(A)n等（3）無內含子（4）含致瘤基因（激素合成有關的基因）（5）含冠癭堿合成代謝基因（6）左邊界、右邊界（RBandLB)序列（對T-DNA轉移的重要性：右邊界更保守）
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